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技術文章

AKTA蛋白純化系統(tǒng)的程序設定操作

AKTA蛋白純化系統(tǒng)的程序設定操作在method editor窗口點擊工具欄內(nèi)的method wizard,彈出窗口界面如Fig 11所示,可以分別在main selection、column以及column position三個下拉菜單中選擇所要用到的層析方法、所用到的層析柱的參數(shù)以及所安裝的層析柱在柱位選擇閥的位置,選好之后,點擊next按鈕進入下一步波長和溶液進口的設定(Fig 12),在此可以設定檢測的波長,針對AKTA EXPLORER可以一次選擇三個波長共同進行監(jiān)控,并在此設定A泵和B泵的溶液進口,設定好之后,點擊next,出現(xiàn)如Fig 13所示窗口,可以在此設定對層析柱進行平衡的條件。
 
 
                                                      Fig 11                                                                                                Fig 12

                                                        Fig 13                                                                                    Fig 14
完成之后,點擊next出現(xiàn)Fig 14的窗口,在此可以設定上樣的條件,可選擇的條件包括上樣的方式,如上樣環(huán)上樣以及樣品泵上樣,對上樣的體積也要進行設定。如果利用系統(tǒng)泵上樣,在此無法進行設置,不過可以利用A泵和B泵的兩個進口在后面的步驟中進行設置。
在上步設置完成之后,點擊NEXT出現(xiàn)如Fig 15所示窗口,這里是針對流穿組分收集所進行一些設置,針對安裝的不同的收集器,具體內(nèi)容可能有些差異,這里顯示的界面是在安裝了Frac-950收集器之后所出現(xiàn)的界面,設置完成點擊NEXT出現(xiàn)如Fig 16所示的窗口,設置目標組分收集的一些參數(shù),點擊NEXT,出現(xiàn)如Fig 17所示的窗口,針對具體的洗脫條件可以進行設置。
當全部設置完成之后,點擊finish,彈出Fig 18所示的窗口,可以再一次對所進行的設置進行進一步的修改,完成之后點擊按鈕,完成程序存盤操作。至此完成洗脫程序的設定工作,在應用自動洗脫程序時,可在SYSTEM CONTROL窗口點擊文件菜單欄中的FILE→Run,在彈出的對話框中選擇目標洗脫程序所在的位置并執(zhí)行,之后會依次彈出一些對話框,主要是再次確認程序的設置條件,并選擇洗脫結(jié)果文件的保存位置,全部設置完之后,洗脫將自動進行,結(jié)果將自動的保存在設定的文件夾中。

                                                  Fig 15                                                                                         Fig 16

                                                    Fig 17                                                                                          Fig 18

結(jié)果的瀏覽與簡單處理
在純化完成后,Unicorn軟件會自動的按照預先的設置保存結(jié)果文件,如果沒有指定,那么結(jié)果文件會保存于一個文件名以manual N開頭的文件中,N為系統(tǒng)依次生成的一個1-10之間的數(shù)字。
對于結(jié)果的瀏覽應在evaluation窗口(Fig 19)中進行,打開文件及對文件進行普通編輯的菜單如Fig 20所示。
 Fig 19 Evaluation窗口 
Fig 20 純化結(jié)果普通編輯菜單

這里已經(jīng)選擇了一個純化文件,打開后,在結(jié)果瀏覽窗口點擊鼠標右鍵,選擇properties,可以彈出如Fig 21所示的操作菜單,可以分別對結(jié)果進行編輯,如改變曲線的顏色,設定橫軸或縱軸的顯示區(qū)間,進行文本文件的編輯等等。

                                                                                         Fig 21

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